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HPLC分析中超纯水有哪些作用?

超纯水在HPLC检测中的主要角色

①样品溶解;

②标准样品制备;

③作为空白试剂;

④清洗器皿。


水质不纯对HPLC检测的影响

离子杂质的危害:影响水的电导率和pH;与溶液中组分反应。改变吸收谱线,影响仪器判读;一些离子会腐蚀仪器

有机物杂质的危害:干扰仪器分析的背景;微生物滋生的营养物质。

颗粒杂质的危害:阻塞过滤系统;损坏泵系统;吸附电荷影响离子浓度。折射光线影响判读;提供细菌滋生载体。

微生物杂质的危害:产生菌膜持续释放污染物;堵塞仪器通道。

气体杂质的危害:影响水的离子浓度和PH值;直接参与反应。影响水有效体积;影响光学测定结果。

TOC过高的危害:灵敏度降低:移动相中的有机分子干扰样品峰。分析结果难以分析及重复性降低:出现unknown的peak判断错误因而提高浓度:杂质与分析物一起流出。滞留时间改变(形成复合物)杂质与介质非可逆性的结合导致分析时间过长并且分辨率降低。


HPLC使用者的期望

稳定的基线(容易进行面积积分)。

良好的分辨率(=分离能力)。

易辨认的对称性波峰。

好的波峰高度/宽度比。

稳定的洗脱时间。


为何在HPLC中要使用超纯水?

用水的纯度决定实验的可控性与重复性使用超纯水对于HPLC分析结果有以下优点:

低颗粒物质污染:较硬的颗粒会刮伤增压泵,较软的颗粒会阻塞进入管柱前的滤膜。颗粒还可能改变样品的组分。

低离子污染:洗脱缓冲液的稳定性好。避免腐蚀性离子影响高压输液泵等配件的使用寿命。

低TOC污染:改善仪器侦测灵敏性,分辨率及重复性,更稳定的滞留时间,色谱基线稳定及保证管柱介质的合理使用寿命。

低微生物污染:避免管柱中出现有机分子的污染,色谱柱堵塞。低气泡:流量稳定,基线平稳,避免色谱图上出现噪声峰,干扰分析。

 


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